第一步：預(yù)先打開培養(yǎng)箱開關(guān)，設(shè)定溫度為20℃(要求培養(yǎng)箱的恒溫變化幅度為±1℃)。

第二步：加熱或冷卻樣品至實(shí)驗(yàn)溫度（一般為20℃），溫度波動范圍在±2℃之內(nèi)。

第三步：曝氣1小時或攪拌半小時使水樣的溶解氧達(dá)到飽和（在20℃左右環(huán)境下）。

第四步：每升水樣添加1mL B1試劑、3mL B2試劑，如有需要可添加2mL硝化抑制劑。

第五步：根據(jù)量程用量筒準(zhǔn)確量取經(jīng)預(yù)處理PH在7.2左右的水樣。

第六步：將水樣通過漏斗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中。

第七步：將清潔的攪拌轉(zhuǎn)子裝入培養(yǎng)瓶中。

第八步：將清潔的密封杯裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)。（為保證密封可以在密封杯上下兩側(cè)涂適量真空硅脂）。

第九步：通過漏斗向密封杯內(nèi)裝入3/4勺（約0.6g）CO2吸收劑。

第十步：擰緊與培養(yǎng)瓶編號對應(yīng)的瓶蓋，將培養(yǎng)瓶按順序放在測定儀主機(jī)上。

第十一步：將測定儀主機(jī)小心緩慢移入培養(yǎng)箱內(nèi)，將電源線連接，并打開開關(guān)進(jìn)行參數(shù)設(shè)置。

第十二步：實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)將培養(yǎng)瓶、密封杯及攪拌轉(zhuǎn)子徹底清洗干凈，待用。

注意：

⒈預(yù)先估計被測樣品的BOD值，如無法估計，可借助化學(xué)需氧量（CODCr）推算。一般BOD量按化學(xué)需氧量（CODCr）的70%計算大致的濃度范圍。根據(jù)水樣個數(shù)及8個培養(yǎng)瓶，選擇需準(zhǔn)備平行樣數(shù)量。水樣須經(jīng)過預(yù)處理其PH值應(yīng)在7.2左右。

⒉如果發(fā)生CO2吸收劑進(jìn)入樣品的情況，應(yīng)倒掉樣品并重新準(zhǔn)備新樣品。注意每個瓶子和密封蓋及管道是配套的，不能互換擰錯瓶蓋，否則數(shù)據(jù)將與瓶中水樣不對應(yīng)。

⒊培養(yǎng)瓶中轉(zhuǎn)子如有轉(zhuǎn)動不好的，輕輕搖晃瓶子使其轉(zhuǎn)動即可，但切勿搖晃幅度過大使CO2吸收劑進(jìn)入水樣。

4.在正常測定時恒溫等待時間不能低于1小時，也不能高于3小時，否則影響測量結(jié)果。環(huán)境溫度接近20℃選擇恒溫1小時，與20℃溫差較大時在范圍內(nèi)適當(dāng)延長恒溫等待時間。

5.數(shù)據(jù)處理，儀器根據(jù)設(shè)定的取樣量可以直讀濃度。用戶只需將同一樣品的平行樣取平均值即為此水樣的BOD值。

6.清洗培養(yǎng)瓶、密封杯及轉(zhuǎn)子時最好選用機(jī)械方法去除污垢，有條件的可選用超聲波清洗機(jī)清洗。