第一步：預(yù)先打開(kāi)培養(yǎng)箱開(kāi)關(guān)，設(shè)定溫度為20℃(要求培養(yǎng)箱的恒溫變化幅度為±1℃)。

第二步：加熱或冷卻樣品至實(shí)驗(yàn)溫度（一般為20℃），溫度波動(dòng)范圍在±2℃之內(nèi)。

第三步：曝氣1小時(shí)或攪拌半小時(shí)使水樣的溶解氧達(dá)到飽和（在20℃左右環(huán)境下）。

第四步：每升水樣添加1mL B1試劑、3mL B2試劑，如有需要可添加2mL硝化抑制劑。

第五步：根據(jù)量程用量筒準(zhǔn)確量取經(jīng)預(yù)處理PH在7.2左右的水樣。

第六步：將水樣通過(guò)漏斗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中。

第七步：將清潔的攪拌轉(zhuǎn)子裝入培養(yǎng)瓶中。

第八步：將清潔的密封杯裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。（為保證密封可以在密封杯上下兩側(cè)涂適量真空硅脂）。

第九步：通過(guò)漏斗向密封杯內(nèi)裝入3/4勺（約0.6g）CO2吸收劑。

第十步：擰緊與培養(yǎng)瓶編號(hào)對(duì)應(yīng)的瓶蓋，將培養(yǎng)瓶按順序放在測(cè)定儀主機(jī)上。

第十一步：將測(cè)定儀主機(jī)小心緩慢移入培養(yǎng)箱內(nèi)，將電源線(xiàn)連接，并打開(kāi)開(kāi)關(guān)進(jìn)行參數(shù)設(shè)置。

第十二步：實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)將培養(yǎng)瓶、密封杯及攪拌轉(zhuǎn)子徹底清洗干凈，待用。

注意：

⒈預(yù)先估計(jì)被測(cè)樣品的BOD值，如無(wú)法估計(jì)，可借助化學(xué)需氧量（CODCr）推算。一般BOD量按化學(xué)需氧量（CODCr）的70%計(jì)算大致的濃度范圍。根據(jù)水樣個(gè)數(shù)及8個(gè)培養(yǎng)瓶，選擇需準(zhǔn)備平行樣數(shù)量。水樣須經(jīng)過(guò)預(yù)處理其PH值應(yīng)在7.2左右。

⒉如果發(fā)生CO2吸收劑進(jìn)入樣品的情況，應(yīng)倒掉樣品并重新準(zhǔn)備新樣品。注意每個(gè)瓶子和密封蓋及管道是配套的，不能互換擰錯(cuò)瓶蓋，否則數(shù)據(jù)將與瓶中水樣不對(duì)應(yīng)。

⒊培養(yǎng)瓶中轉(zhuǎn)子如有轉(zhuǎn)動(dòng)不好的，輕輕搖晃瓶子使其轉(zhuǎn)動(dòng)即可，但切勿搖晃幅度過(guò)大使CO2吸收劑進(jìn)入水樣。

4.在正常測(cè)定時(shí)恒溫等待時(shí)間不能低于1小時(shí)，也不能高于3小時(shí)，否則影響測(cè)量結(jié)果。環(huán)境溫度接近20℃選擇恒溫1小時(shí)，與20℃溫差較大時(shí)在范圍內(nèi)適當(dāng)延長(zhǎng)恒溫等待時(shí)間。

5.數(shù)據(jù)處理，儀器根據(jù)設(shè)定的取樣量可以直讀濃度。用戶(hù)只需將同一樣品的平行樣取平均值即為此水樣的BOD值。

6.清洗培養(yǎng)瓶、密封杯及轉(zhuǎn)子時(shí)最好選用機(jī)械方法去除污垢，有條件的可選用超聲波清洗機(jī)清洗。